4℃冰箱中保存时间切勿超过1个月.由于血清结冰时体积会增加约10%,因此,血清在冻入低温冰箱前,必须预留一定体积空间,否则易发生污染或玻璃瓶冻裂.一般厂商提供的血清为无菌,无需再过滤除菌.如发现血清有悬浮物,则可将血清加入培养液内一起过滤,切勿直接过滤血清!瓶装血清解冻需采用逐步解冻法:-20℃至-70℃低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。然后移入室温,待全部溶解后再分装。在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生.
切勿将血清在37℃放置太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中的有效成分会破会而影响血清质量。血清中的沉淀物絮状物:主要是血清中的脂蛋白变性及解冻后血清中纤维蛋白造成,这些絮状物不会影响血清本身的质量!可用离心3000rpm,5分钟去除,也可不用处理.显微镜下“小黑点”:经过热处理过的血清,沉淀物的形成会显著增多.有些沉淀物在显微镜下观察象“小黑点”,常误认为血清受污染.一般情况下,此小黑点不会影响细胞生长,但如果怀疑血清质量,则应立即停止使用,更换另一批号的血清!
德国PAN公司的ES级别胎牛血清ST30-2602是经过严格工艺筛选出来的优级系列,严格的质量控制,批间差异较小,质量稳定性好,内毒素含量低,无病毒、支原体,具有较高安全性。细胞培养测试显示多种细胞系更好的生长特性,适用于品种繁多的细胞培养!胎牛采集血清前,怀孕胎牛会按欧洲EURegulation999/2001规定进行BSE检测,只有BSE检测阴性的才被采集;胎牛血清经3次100纳米过滤,经BVD、IBR、PI3等病毒检测;细菌、真菌、支原体检测;每一批胎牛血清都经生长测试和克隆率测试,测试细胞包括:HeLa,L929,SP2/O-AG14,MRC-5,CHOandBHK!
上海正规ST30-2602胎牛血清效果好
血清除含有促进细胞生长的成分外,同时含有内毒素、血色素、补体、抗体等其他有害成分,影响细胞生长甚至导致细胞死亡,因此,通常需要测试工作才知道对细胞生长的效果。低质量的血清常被病毒、真菌和支原体等微生物感染,导致细胞培养失败,浪费了科研人员的时间和精力!此外,由于血清是一种生物制品,来源动物的血源地以及健康状况就会对血清的品质有很大的影响!除了自然生长的气候和环境,地域性疯牛病风险评估(GBR)定性评估了一个国家或地区的牛感染如疯牛病的可能性,新西兰和澳大利亚被评为了风险低的GBR1级。
同时,中国国家质检总局也明确规定了目前允许进口的牛血液制品的产地为新西兰和澳洲!因此,选择来源安全稳定,品质好的血清产品对细胞培养来说是至关重要的。德国PAN胎牛血清详细描述:1)内毒素含量极低1UI/ml(国际规定:TE级胎牛血清10UI/ml),极利于细胞的生长和传代;2)具有欧洲药品监督委员会(EDQM)颁发的产品证书,符合欧洲药典的1483条规定;3)GMP条件下生产,具有质量认证体系证书;4)每个批号血清均具有完整的检验报告;5)三次0.
切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀!热灭活是指56℃,30分钟加热已完全解冻的血清。加热过程中须规则摇晃均匀!此热处理的目的是使血清中的补体成分(complement)灭活!除非必须,一般不建议作此热处理,因为热处理会造成血清沉淀物显著增多,而且还会影响血清的质量!补体参与反应有:细胞毒作用,平滑肌细胞收缩,肥大细胞和血小板释放组胺,增强吞噬作用,促进淋巴细胞和巨噬细胞发生化学趋化和活化!